Abstract
Aim: A major problem in the treatment of ovarian cancer, which has the highest mortality rates among gyneacological malignancies, is recurrence and chemoresistance. In the cancer tissue, this population of long-lived cells with extraordinary expansion potential has been called tumor initiating cells or cancer stem cells (CSCs). It is thought that CSCs are responsible for these aggressive and recurrent tumors. These cells that differentiate from normal stem cells and form tumor tissue are isolated in-vitro via the Multicellular Tumor Spheroid Model. In this study, Gemcitabine (2′2′-difluorodeoxycytidine, Gemzar®), which is a deoxycytidine analog with excellent antitumor activity has been used for its anti-apoptotic effects.. Material and Methods: CSC isolation was been performed in-vitro three dimensional cell cultures from MDAH-2774 ovarian CSC line and acts of Gemcitabine were determined. CSCs treated at 24th and 96th hours were analyzed for apoptotic alterations with p-53, bcl-2, and caspase-3 immunoreactivity. Results: For the Gemcitabine group, p53 immunoreactivity increased at 24th and 96th hours and bcl-2 decreased at the 24th hour while an apparent increase was determined at 96th hours. Caspase-3 decreased for both groups at 24/96 hours while caspase-3 revealed decrease at 96th hours. Conclusion: Increase in p53 immunoreactivity as well as decrease in bcl-2 display that drug activity is through these pathways while caspase-3 pathway is not active. Therefore, the expected increase could not be assessed. Until now, drug sensitivity tests and effects on CSCs have been evaluated with monolayer cell culture systems. It is appropriate to evaluate these studies with CSCs isolation technique.
Abstract
Amaç: Mortalitesi en yüksek jinekolojik kanser olan over kanserinin tedavisindeki asıl problem nüks ve kemoterapi direncidir. Kanser dokusunda, patogenezisden sorumlu tutulan, artmış büyüme potansiyeline sahip, uzun ömürlü hücre popülasyonu kanser kök hücreleri (KKH) olarak adlandırılırlar. KKH'lerinin kemo-rezistans ve agresif tekrarlayan tümörlerden sorumlu olduğu düşünülmektedir. Normal kök hücreden farklılaşarak kanser dokusunu oluşturan bu hücreler in-vitro koşullarda Multisellüler Tümör Sferoid Model (MTS) kullanılarak izole edilmektedirler. Bu çalışmada yüksek anti-tümör aktivitesine sahip, deoksisitidin analoğu Gemcitabine (2′2′-difluorodeoxycytidine, Gemzar®)'nin KKH'leri üzerinde anti-apoptotik etkileri incelenmiştir. Yöntem ve Gereç: MDAH-2774 insan over kanseri hücre hattından üç boyutlu hücre kültürü ile KKH izolasyonu yapılmış ve sferoidler Gemcitabine ile etkileştirilmiştir. 24. ve 96. saatlerde ilaçla etkileşen hücrelerdeki apoptotik değişiklikler p53, bcl-2, caspase-3 immunoreaktivitesiyle değerlendirilmiştir. Bulgular: p53 immunoreaktivitesi açısından Gemcitabine uygulanan grupta 24. ve 96. saatlerde artış görülmektedir. 24. saatlerde Gemcitabine uygulanan grupta bcl-2 immunoreaktivitesi azalmışken, 96. saatte 24. saate oranla bcl-2 belirgin artmıştır. Caspase-3 immunoreaktivitesi 24/96 saat arasında her iki grupta azalırken, 96. saatte Gemcitabine grubunda caspase-3'te azalma görülmüştür. Sonuç: p53 immunoreaktivitesinde artış ile bcl-2'deki azalma ilaç etkinliğinin bu apoptotik yolakları kullanarak gerçekleştiğini düşündürürken, caspase-3'de beklenen artışın olmaması caspase yolağının kullanılmadığını düşündürmektedir. Bugüne kadar ilaç duyarlılık testleri ve KKH üzerine etki mekanizmaları araştırma deneyleri tek tabaka hücre kültürleri ile değerlendirilmiştir. Bu araştırmaların KKH izolasyon tekniği kullanılarak değerlendirilmesi uygun olacaktır.
Details
| Other ID | JA66YY74RN |
|---|---|
| Journal Section | Research Articles |
| Authors | |
| Publication Date | June 1, 2011 |
| Submission Date | June 1, 2011 |
| Published in Issue | Year 2011Volume: 50 Issue: 2 |